作为较新的检测技术,近年来基因芯片被广泛应用与优化,更高效、更稳定。魏春霞等根据已知的7种牛易感病原核酸序列,利用多重PCR方法,通过肉眼观察芯片显色程度后,对芯片技术进行优化,建立了具有高通量、高灵敏度、高特异性等特点的基因芯片检测方法。该方法可在3h内同时检测牛7种病原间无交叉反应,所有芯片可重复使用,且芯片在2~8℃条件下能保存半年以上,可满足一般实验室的样品检测及流行病学监查,同时重复使用也可降低成本。刘志鹏等建立了可鉴定和区分口蹄疫病毒O、A和AsiaⅠ型3种血清型的分型芯片,灵敏度比常规PCR高10~100倍,特异性也较高,芯片可重复使用,保存3个月以上。
加样:调整移液器刻度,设定容量值。移液器移取液体试剂和样品血清。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将吸头插入液面下2~3mm,用大拇指将移液器顶部按钮按至***停点,然后慢慢松开按钮回原点,接着将按钮按至***停点排出液体稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体后松开按钮。使用多道(如8道或12道)移液器,则可以将移液器的***道对准***个***头,然后倾斜插入,前后方向摇动即可卡紧,避免用重力撞击,吸头卡紧后可看到连接部分形成清晰的密封圈。处理大批量样本时,首孔与末孔加样时间间隔过长会导致各微孔间有不同的起始反应时间,从而影响到测量值的准确性和重复性。为保证不同样品的孵育时间一致,可先取待检样品、FDMVAC阴性血清、FDMVAC阳性血清不低于10μl分别加入96孔板中并做好记录,然后用多道移液器移至FDMVAC抗原包被板相应孔中。也可在抗原包被板直接加样。
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