秋季免疫后1个月内,选择5个免疫口蹄疫多价灭活苗的规模化育肥场,存栏4000头左右。对每个场随机选取100头育肥猪进行血液样品采集,**部位为前腔静脉,血量为5mL左右,共采集500份血液样品,样品按照不同养殖场进行分类,用油性记号笔在**器表面标记样品并编码。将装血样的**管斜置或平放静置30min,待血清析出后,送至实验室,离心分离血清,备用。然后使用采购自中国农业科学院兰州兽医研究所的口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒检测血清中猪口蹄疫的抗体,并记录结果。
洗涤:①手工清洗微孔板内的残余物质。将提前配置的洗涤液加入移液槽里,然后快速甩掉微孔板内反应液于废液池内,用300μL量程的多道移液器吸取280μL洗涤液,在微量血凝板上方倾斜45度以吸头出水口对准微孔逐一冲洗3~5次(依据日常操作习惯微孔板近身端可微微平行向右偏移10°左右,更利于移液器吸头对准微孔板各孔进行洗板),将各孔注满洗液,静置1min,甩掉微孔板内洗液,按照以上步骤重复3次。手工清洗应注意冲洗水流的力度适中,不宜过大。洗涤时各孔均需加满洗涤液(不能过满,防止溢出),防止孔口有游离的物质不能洗净。洗板结束后必须立即拍打干净,不可使酶标板自然干燥。②洗板机:自动清洗微孔板内的残余物质。将提前配置的洗液加入自动洗板机的洗液瓶里,然后快速甩掉微孔板内反应液于废液池内,使用洗板机洗板3次,每次浸泡1min,清洗后拍干反应板。洗板机喷水口很容易被洗液形成的结晶物堵塞,造成各孔间较大差异,因此应当注意按时对洗板机进行清洁保养。
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